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Please use this identifier to cite or link to this item: http://hdl.handle.net/10400.5/3738

Title: New insights in the immuno-endocrine regulation of equine reproduction : in vitro studies on luteal and endometrial function
Authors: Galvão, António Miguel Gonçalves Travassos
Advisor: Dias, Graça Maria Leitão Ferreira
Mateus, Luísa Maria Freire Leal
Keywords: TNF
IFNG
FASL
Corpus luteum
Luteotrophic
Luteolysis
Endometrium
Angiogenesis
Mare
FNT
Corpo lúteo
Luteotrófico
Luteólise
Endométrio
Angiogénese
Égua
Issue Date: 3-Oct-2011
Publisher: Universidade Técnica de Lisboa. Faculdade de Medicina Veterinária
Citation: GALVÃO, A. M. G. T. (2011). New insights in the immuno-endocrine regulation of equine reproduction : in vitro studies on luteal and endometrial function. Tese de Doutoramento. Universidade Técnica de Lisboa, Faculdade de Medicina Veterinária, Lisboa.
Abstract: Coordination of reproductive events in the ovary and uterus demands the action of diverse factors as steroid hormones, eicosanoids, growth factors or cytokines on the regulating of processes such as angiogenesis, cell growth and differentiation, and apoptosis. Thus, the objectives of this study were to evaluate the influence of cytokines tumor necrosis factor α (TNF), interferon gamma (IFNG) and Fas Ligand (FASL) on the regulation of secretory function, angiogenesis, cell viability and apoptosis in the equine: (i) corpus luteum (CL) during luteal establishment and functional and structural regression; and (ii) endometrium during follicular phase (FP) and mid luteal phase (MLP), at cell, gene and molecular levels. All studied cytokine ligands and receptors were expressed in the equine CL, throughout the luteal phase, and in the endometrium, throughout the estrous cycle. During CL growth, TNF was shown to stimulate in vitro P4 and PGE2, to inhibit PGF2α secretion and to increase VEGF expression and angiogenic factors production. Thus, among all cytokines studied, TNF might give a luteotrophic contribution for CL establishment. Conversely, during CL regression, all cytokines alone reduced P4 and PGE2 secretion, while both FASL and TNF stimulated PGF2α secretion. TNF and IFNG reduced angiogenic factors secretion and FASL decreased VEGF expression. Cytokine association (TNF+IFNG+FASL) effectively promoted apoptosis and reduced luteal cell viability. Besides, they stimulated PGF2α and inhibited P4, PGE2 secretion and angiogenesis. In conclusion, cytokines interaction appears to coordinate functional and structural luteolysis in the mare. Concerning TNF role on endometrial cells, it can be concluded that during MLP, this cytokine stimulated PGE2 secretion, promoted angiogenic activity and NO secretion and increased endometrial cells viability. The interaction between TNF, oxytocin and steroid hormones was shown to be determinant for physiologic regulation of equine endometrium.
RESUMO - Novas perspectivas na regulação imuno-endócrina da reprodução equina: estudos in vitro da função lútea e endometrial. - A coordenação da função reprodutora no ovário e no útero requer a participação de diversos factores como hormonas esteróides, eicosanóides, factores de crescimento ou citocinas, responsáveis por regular processos biológicos como a angiogénese, o crescimento e diferenciação celular e a apoptose. Assim, o presente estudo teve como objectivo avaliar a influência das citocinas factor de necrose tumoral α (FNT), interferão gama (IFNG) e Fas Ligando (FASL) na regulação da função secretora, angiogénese, viabilidade celular e apoptose: (i) no corpo lúteo (CL) durante o seu estabelecimento e regressão funcional e estrutural; e (ii) no endométrio durante as fases folicular (FF) e lútea média (FLM), a nível celular, molecular e genético na égua. A expressão de todos os ligandos e receptores das citocinas estudadas foi confirmada no CL, ao longo da fase lútea, e no endométrio, ao longo do ciclo éstrico. Durante o crescimento do CL, FNT estimulou a produção in vitro de P4 e PGE2, inibiu a secreção de PGF2α e aumentou a expressão de VEGF e a produção de factores angiogénicos. Desta forma, de todas as citocinas estudadas, FNT poderá contribuir como factor luteotrófico para o estabelecimento do CL. Contrariamente, aquando da regressão lútea, todas as citocinas individualmente reduziram a secreção de P4 e PGE2, enquanto FASL e FNT estimularam a secreção de PGF2α. FNT e IFNG inibiram a secreção de factores angiogénicos e FASL diminuiu a expressão de VEGF. A associação de citocinas FNT+IFNG+FASL promoveu de forma efectiva a apoptose e a redução da viabilidade das células lúteas. Além disso, estimulou a secreção de PGF2α e diminuiu as de P4 e PGE2, bem como inibiu a angiogénese. Concluindo, a interacção entre as várias citocinas parece coordenar a regressão funcional e estrutural do CL na égua. Considerando o papel do TNF nas células endometriais, conclui-se que, durante a FLM, este factor estimulou a secreção de PGE2, promoveu a produção de factores angiogénicos e de NO e aumentou a viabilidade das células endometriais. A interacção entre o FNT, a ocitocina e as hormonas esteróides provou ser determinante para a regulação fisiológica do endométrio equino.
Description: Tese de Doutoramento em Ciências Veterinárias. Especialidade de Ciências Biológicas e Biomédicas
URI: http://hdl.handle.net/10400.5/3738
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