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Title: Influência do uso de fluoroquinolonas no aparecimento de Escherichia coli e Salmonella spp. multirresistentes em vitelos
Authors: Centeno, Maria Madalena Gomes Ferreira Lopes
Advisor: Pomba, Maria Constança Matias Ferreira
Lima, Miguel Luís Mendes Saraiva
Keywords: Fluoroquinolonas
Multirresistência
Vitelos
Escherichia coli
Salmonella spp.
ESBL
Fluoroquinolones
Multidrug-resistance
Calves
Issue Date: Dec-2010
Publisher: Universidade Técnica de Lisboa. Faculdade de Medicina Veterinária
Citation: CENTENO, M. M. G. F. L. (2010). Influência do uso de fluoroquinolonas no aparecimento de Escherichia coli e Salmonella spp. multirresistentes em vitelos. Dissertação de Mestrado. Universidade Técnica de Lisboa, Faculdade de Medicina Veterinária, Lisboa.
Abstract: Influência do uso de fluoroquinolonas no aparecimento de Escherichia coli e Salmonella spp. multirresistentes em vitelos Neste estudo, avaliou-se a influência da administração de enrofloxacina no leite (50mg/L) e a susceptibilidade dos isolados de Escherichia coli e Salmonella spp. obtidos a partir de fezes de vitelos saudáveis (n=106) de uma exploração no Alentejo. A cada vitelo foram recolhidas amostras às 2 (T0, antes da administração da enrofloxacina), às 6 (T1, após 3 administrações de 5 dias consecutivos intervaladas por 5 dias cada) e às 10 semanas de idade (T2). Entre Fevereiro e Maio de 2010, obteveram-se 237 isolados de E. coli que foram identificados por PCR para o gene gadA (McDaniels et al., 1996) e 12 isolados de Salmonella spp. serotipificados de acordo com o esquema Kauffmann-White. Os testes de susceptibilidade foram efectuados através do método de difusão por discos com os seguintes antibióticos: enrofloxacina (5!g), ampicilina (10!g), amoxicilina/ácido clavulânico (20/10!g), ceftiofur (30!g), tetraciclina (30!g) e trimetoprim/sulfametoxazole (1,25/23,7!g) e os resultados interpretados de acordo com as normas M31-A3 (CLSI, 2008). As estirpes produtoras de ESBL foram detectadas pelo método de disco duplo para detecção de sinergias. Os dados foram analisados segundo o modelo de regressão logística (SAS v9.2 software). A resistência dos isolados de E. coli foi 69,23% (T0), 79,75% (T1) e 89,66% (T2) à ampicilina; 0%, 2,53% e 1,72% à amoxicilina/ácido clavulânico; 27,88%, 3,80% e 22,41% ao ceftiofur; 35,58%, 98,73% e 72,41% à enrofloxacina; 78,85%, 94,94% e 94,83% à tetraciclina e 64,42%, 77,22% e 70,69% ao trimetoprim/sulfametoxazole. Obteve-se 18,81% (T0), 0% (T1) e 19,29% (T2) de isolados resistentes ao ceftiofur e com sinergia e, por isso, produtores de ESBL’s. Houve diferenças muito significativas (p<0.001) no aparecimento de estirpes de E. coli multirresistentes em T0, T1 e T2. Quanto à Salmonella spp. obteve-se uma prevalência em T0 de 4,7% (IC95%: 2.0 – 10.6), 0% (IC95%: 0.0 – 4.5) em T1 e 11,7% (IC95%: 5.8 – 22.2) em T2. A serotipificação identificou 3 Salmonella Typhimurium, 1 Salmonella Dublin e 1 Salmonella Newport nos isolados de T0 e 7 Salmonella Dublin nos isolados de T2. A resistência dos isolados de Salmonella spp. foi: ampicilina – 80% (T0) e 0% (T2); amoxicilina/ácido clavulânico, ceftiofur e enrofloxacina - 0% em T0 e T2; tetraciclina - 80% e 42,86% e trimetoprim/sulfametoxazole - 20% e 0%. Não foi possível relacionar estatisticamente a influência das fluoroquinolonas com o aparecimento de isolados de Salmonella spp. multirresistente. Este estudo demonstra que há influência da exposição dos vitelos às fluoroquinolonas no aparecimento de E. coli multirresistente.
ABSTRACT - Influence of the use of fluoroquinolones in the appearance of multi-resistant Escherichia coli and Salmonella spp. in calves - In this study the influence of enrofloxacin administration in milk (50 mg/L) and the susceptibility of E. coli and Salmonella spp. isolates from faeces samples of healthy calves (n=106) from a Portuguese farm were evaluated. Each calf was sampled at 2 (T0, before enrofloxacin administration), 6 (T1, after 3 administrations of 5 consecutive days with a 5 day interval each) and 10 weeks of age (T2). Between February and May 2010 we obtained 237 E. coli isolates that were identified by the gadA gene PCR (McDaniels et al., 1996) and 12 Salmonella spp. isolates that were serotypified according to the Kauffmann-White scheme. Antimicrobial susceptibility testing was done by the disk diffusion method with the following antimicrobials: enrofloxacin (5!g), ampicillin (10!g), amoxicillin/clavulanic acid (20/10!g), ceftiofur (30!g), tetracycline (30!g) and trimethoprim/sulfamethoxazole (1.25/23.7!g) and interpreted by the M31-A3 guidelines (CLSI, 2008). The ESBL-producing E. coli isolates were detected by the double disk diffusion test. Data was analysed by the logistic regression model (SAS v9.2 software). E. coli resistance to ampicillin was 69,23% (T0), 79,75% (T1) and 89,66 (T2); to amoxicillin/clavulanic acid 0,00%, 2,53% and 1,72%; to ceftiofur 27,88%, 3,80% and 22,41%; to enrofloxacin 35,58%, 98,73% and 72,41%; to tetracycline 78,85%, 94,94% and 94,83% and to trimethoprim/sulfamethoxazole 64,42%, 77,22% and 70,69%. 18.81% (T0), 0% (T1) and 19.3% (T2) were isolates resistant to ceftiofur and with synergy therefore ESBL-producing isolates. There was high significant difference (P<0.001) between multidrug-resistant strains raise in E. coli isolates from T0, T1 and T2. As for the Salmonella spp. isolates we obtained a prevalence of 4,7% (IC95%: 2.0 – 10.6) on T0, 0% (IC95%: 0.0 – 4.5) on T1 and 11,7% (IC95%: 5.8 – 22.2) on T2 moments. The serotipification identified 3 Salmonella Typhimurium, 1 Salmonella Dublin and 1 Salmonella Newport from T0 isolates and 7 Salmonella Dublin from T2 isolates. Salmonella spp. resistance after TSA was: ampicillin – 80% (T0) and 0% (T2); amoxicillin/ clavulanic acid, ceftiofur and enrofloxacin - 0% on both T0 and T2; tetracycline - 80% and 42,86% and trimethoprim/sulfamethoxazole - 20% and 0%. It was not possible to establish a statistic relation between the influence of fluoroquinolones and the appearance of multi-resistant Salmonella spp. This study demonstrates that calves’ exposure to fluoroquinolones influences the emergence of multidrug-resistance among E. coli isolates.
Description: Dissertação de Mestrado Integrado em Medicina Veterinária
URI: http://hdl.handle.net/10400.5/2771
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