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Norovirus outbreaks in the portuguese army

2020-06-26T14:41:29Z

Título: Norovirus outbreaks in the portuguese army Autor: João, António Eduardo Bruno Lopes Resumo: Gastrointestinal infections have consistently been among the most frequent diseases and non-battle injuries, degrading operational effectiveness and force readiness in the military. Noroviruses appear as the most frequent agents causing acute gastrointestinal illness both in maritime and land theatres of operations, as well as in stationed troops or military training centers in many western countries. Nevertheless, little is known on the burden of norovirus gastroenteritis in the Portuguese military. In this work we set out to establish a gastroenteritis outbreak surveillance system (GOSS) to report disease cases to the Bromatology and Biologic Defense Laboratory during the five-year period, 2013-2017. During this period 14 gastroenteritis outbreaks were registered that affected a total of 410 military. Noroviruses were responsible for the majority of the outbreaks (8/14) and disease cases (210/410). Norovirus outbreaks occurred either in military exercises or in military bases and showed to have an impact on force readiness and operational effectiveness. In most cases the origin of the outbreaks was difficult to confirm but five (63%) were likely foodborne (including food handlers) or waterborne and three (37%) had predominant person-to-person transmission. Outbreaks were caused by both genogroup (G) I and II, but G II clearly outnumber those caused by G I (6/8) and case numbers (145/210). Norovirus GI was associated with waterborne outbreaks while GII was associated to foodborne and person-to-person transmission. Each outbreak was caused by a different genotype highlighting the high genetic diversity of the circulating noroviruses. Three of the identified genotypes (GI.9, GII.17 and GII.16-GII.2) were reported for the first time in Portugal. In conclusion, the present thesis identified norovirus as the most important etiologic agent of acute gastroenteritis outbreaks and the most frequent cause of food- and waterborne illness in the Portuguese Army. This work had contributed to change preventive measures and allowed the reinforcement of control actions that minimized the impact of norovirus outbreaks.; RESUMO - Surtos de gastrenterite por norovírus no Exército Português - As infeções gastrointestinais encontram-se entre as doenças mais frequentemente reportadas como causa de diminuição da capacidade operacional e da prontidão de uma força militar. Os norovírus são os agentes mais vezes implicados na doença aguda gastrointestinal em teatros de operações, marítimos e terrestres, e em forças estacionadas ou centros de treino militares das Forças Armadas de Países Ocidentais. Esta tese teve como principal objetivo avaliar a relevância da gastrenterite aguda causada por norovírus no Exército Português. Foi estabelecido um sistema de vigilância no Exército, de modo que todos os surtos de gastroenterite são reportados ao Laboratório de Bromatologia e Defesa Biológica. Assim, verificou-se que entre 2013 e 2017 foram registados 14 episódios, que afetaram cerca de 410 militares, tendo os norovírus sido responsáveis pela maioria dos surtos (8/14) e dos casos (210/410). Os surtos ocorreram em exercícios militares e em bases do Exército com impacto na capacidade operacional e funcionamento regular das Unidades. Embora a origem destes tenha sido difícil de confirmar, acredita-se que 5 (63%) tiveram origem alimentar (incluindo os manipuladores de alimentos e a água) e que em 3 (37%) predominou a transmissão pessoa a pessoa. Os surtos foram causados por norovírus dos genogrupos (G) I e II, contudo o G II foi responsável pelo maior número de surtos (6/8) e casos (145/210). O genogrupo I esteve associado à água e o genogrupo II à transmissão pessoa a pessoa ou aos alimentos. Cada surto foi causado por um genótipo distinto, refletindo a grande diversidade genética dos norovírus que se encontram em circulação. Três dos genótipos identificados (GI.9, GII.17 e GII.16-GII.2) foram reportados pela primeira vez em Portugal. Ao identificar o norovírus como o mais importante agente etiológico de surtos de gastroenterite aguda e de doença com origem nos alimentos e na água no Exército Português, o presente trabalho contribuiu para a alteração de medidas preventivas de doenças de origem alimentar e para o reforço de ações de controlo dos surtos causados por este agente. Descrição: Tese de Doutoramento em Ciências Veterinárias na especialidade de Segurança Alimentar

Novel therapeutic strategies for the management of diabetic foot infections : the evaluation of selected antimicrobial peptides against clinically isolated bacterial pathogens

2020-06-17T15:41:46Z

Título: Novel therapeutic strategies for the management of diabetic foot infections : the evaluation of selected antimicrobial peptides against clinically isolated bacterial pathogens Autor: Santos, Tânia Raquel Martins dos Resumo: Diabetic foot infections (DFIs) are a frequent complication of Diabetes mellitus. These ulcers are prone to be colonized by Staphylococcus aureus and Pseudomonas aeruginosa, including multidrug resistant and biofilm-producing strains, possibly leading to DFI chronicity and amputation. New therapeutic strategies for DFI management are urgent and the antimicrobial peptides (AMPs) nisin and pexiganan are potential candidates. This project aimed to evaluate the activity of these AMPs, incorporated in a guar gum biogel, against selected DFI clinical isolates. Firstly, nisin’s activity against a collection of S. aureus DFI clinical isolates was determined. Results showed that nisin was able to inhibit and eradicate S. aureus planktonic and biofilm cells at concentrations below its acceptable daily intake. When incorporated in the biogel, nisin kept its antimicrobial activity. This work also evaluated the potential of nisin to complement the activity of conventional antiseptics and antibiotics against established biofilms formed by these isolates. An in vitro antimicrobial schematic protocol was developed to mimetize DFI management guidelines. Fifteen antimicrobial combinations, including nisin-biogel, chlorhexidine, clindamycin, gentamicin and vancomycin, were tested. Results showed that the higher levels of biofilm inhibitory effects were presented by therapeutic combinations that included the nisin-biogel formulation. Nisin-biogel ideal storage conditions and cytotoxicity were also evaluated. Results demonstrate that if stored at temperatures between -20 and 22ºC, nisin-biogel is able to maintain its antimicrobial activity up to 24 months. Moreover, after 24 h of exposition, the nisin-biogel presented no significant levels of toxicity regarding the human keratinocytes under study. Lastly, to cover the complex microbiota present in DFIs, a combination of AMPs with different action spectra was developed, based on the simultaneous incorporation of nisin and pexiganan in the biogel. The activity of this dual-AMPs formulation was tested against two S. aureus and P. aeruginosa strains isolated from the same DFI. Acting together, these AMPs were able to diffuse from the biogel and inhibit and eradicate biofilms formed by these DFI isolates. The effectiveness of AMPs, particularly nisin and pexiganan, as novel antimicrobial strategies for the management of DFIs is still an unknown territory that merits investigation. In vitro biofilm models are the basis of preliminary research; however, they underrepresent the complex microbiota present in DFIs and their interaction with the immune system and skin cells constituents. Further research is necessary to understand the AMPs full potential regarding the clinical management of biofilm-related diseases, such as DFIs.; RESUMO - As infecções do pé diabético (IPDs) são uma complicação frequente da Diabetes mellitus. Estas úlceras tendem a ser colonizadas por Staphylococcus aureus e Pseudomonas aeruginosa, incluindo estirpes multirresistentes e produtoras de biofilme, possivelmente causando cronicidade da IPD e amputação. É urgente criar novas estratégias para o tratamento das IPD e os péptidos antimicrobianos (PAMs) nisina e pexiganan são potenciais candidatos. Este projecto avaliou a actividade destes PAM, incorporados num biogel de goma de guar, contra isolados de IPD. Primariamente, foi determinada a actividade da nisina contra uma colecção de S. aureus isolados de IPD. Os resultados mostraram que a nisina é capaz de inibir e erradicar S. aureus na forma planctónica e de biofilme a concentrações abaixo da dose diária recomendada. Quando incorporada no biogel, a nisina manteve a sua actividade. Foi ainda avaliado o potencial da nisina para complementar a actividade de antissépticos e antibióticos convencionais contra biofilmes formados por estes isolados. Foi criado um protocolo que simula in vitro o tratamento convencional das IPDs. Foram testadas 15 combinações de antimicrobianos, incluindo biogel de nisina, clorohexidina, clindamicina, gentamicina e vancomicina. Os resultados mostraram que o maior efeito inibidor de biofilmes pertencia a combinações que incluam o biogel de nisina. Foram também avaliadas as condições de armazenamento ideais para o biogel de nisina e a sua citotoxicidade. Quando armazenado a temperaturas entre -20 e 22ºC, o biogel de nisina manteve a sua actividade antimicrobiana durante pelo menos 24 meses. Adicionalmente, após exposição durante 24 horas, o biogel de nisina não apresentou níveis significativos de toxicidade relativamente aos queratinócitos humanos em estudo. Por último, para abranger a complexa microbiota presente nas IPDs, foi avaliada uma combinação de PAMs com diferentes espectros de acção, baseada na incorporação simultânea de nisina e pexiganan no biogel. A actividade desta formulação foi testada contra duas estirpes de S. aureus e P. aeruginosa isoladas da mesma IPD. Conjuntamente, estes PAMs foram capazes de se difundir do biogel e inibir e erradicar biofilmes formados por estes isolados. A eficácia dos PAMs como novas estratégias para o tratamento das IPD é ainda uma área desconhecida. Os modelos in vitro de biofilmes são a base da investigação; contudo, não representam a microbiota presente nas IPD nem a sua interacção com o sistema imunitário e outros constituintes celulares. É essencial continuar a investigar para compreender o potencial dos PAMs na terapêutica de doenças onde haja formação de biofilmes, como é o caso das IPDs. Descrição: Tese de Doutoramento em Ciências Veterinárias na Especialidade de Ciências Biológicas e Biomédicas

Toxoplasma gondii Tubulin Cofactor B plays a key role in host cell invasion and replication

2020-06-18T08:36:39Z

Título: Toxoplasma gondii Tubulin Cofactor B plays a key role in host cell invasion and replication Autor: Francisco, Samuel Nuno Furtado da Conceição Resumo: Tubulin cofactors participate in the folding, dimerization, and dissociation pathways of the tubulin dimer, being implicated in the control of tubulin proteostasis and consequently in the control of microtubule (MT) dynamics in vivo. We hypothesise that these proteins have a role in the regulation of MT cytoskeleton dynamics during Toxoplasma gondii host cell invasion. In this context, we characterized the Tubulin cofactor B (TBCB) in T. gondii. TBCB is a CAPGly domain-containing protein that together with TBCE, interact with and dissociate the tubulin dimer. The TBCB sub-cellular localization in T. gondii was studied using an in-house anti-TBCB serum. T. gondii lines overexpressing TBCB were obtained by random integration as well as TBCB conditional knockout lines by CRISPR/Cas9 system. TBCB transgenic clones were characterized by growing assays (plaque, invasion, replication and egress assays), western blot analysis and fluorescence microscopy (standard, confocal and super-resolution). TBCB showed a polarized localization, at the anterior region of the parasite, under the conoid and in close association with polar ring and subpellicular MTs. It did not present a clear co-localization with the apical complex secretory vesicles, although the interaction with rhoptries and micronemes cannot be excluded. TBCB overexpression lines showed a significant decrease in the capacity to form plaques, attributable to a proportional reduction in the capacity to invade. No differences were observed in replication and egress assays. The TgTBCB knockout line, showed a complete depletion of the protein and a viability no longer than a week. These lines showed a strong reduction in their capacity to invade the host cell and in their replication rate. In the absence of TBCB, cells have an altered axis of division resulting in abnormal division. Some parasites show the loss of the correct division axis and some parasites have four daughter cells forming inside instead of two. TBCB is a polarity marker in T. gondii and is involved in the invasion and replication processes. Its apical localization, together with TBCB mammalian partners already described (MT associated proteins) and the invasion phenotypes, suggest that TBCB can be involved in the intracellular traffic of secretory vesicles depending on MTs. Importantly, TBCB is an essential protein, constituting a good target for new control strategies.; RESUMO - O Cofactor B da Tubulina de Toxoplasma gondii tem um papel central na invasão da célula hospedeira e na replicação - Os parasitas protozoários pertencentes ao Filo Apicomplexa são agentes patogénicos responsáveis por um vasto leque de doenças. Apesar da grande biodiversidade deste filo, os mecanismos moleculares adjacentes ao processo de invasão das células hospedeiras parecem ser conservados entre as diferentes espécies. O processo de invasão das células hospedeiras tem gerado grande interesse em vários grupos, incluindo o nosso, visto ser um importante alvo para o delineamento de estratégias médicas profilácticas e terapêuticas. Assim, nos últimos anos o nosso grupo tem vindo a interessar-se pelo estudo e compreensão do envolvimento do citoesqueleto de microtúbulos, tanto do parasita como da célula hospedeira, no processo de invasão. Os nossos resultados anteriores em Besnoitia besnoiti mostraram que este parasita, aquando da interação com a célula hospedeira, sofre alterações dramáticas na sua forma e superfície, acompanhadas pela remodelação de estruturas específicas de microtúbulos (MTs), nomeadamente os MTs subpeliculares. Estas alterações foram evidenciadas através de uma marcação distinta da tubulina na zona posterior do parasita. Para além disso, o citoesqueleto de MTs da célula hospedeira também responde à entrada do parasita, resultados que, posteriormente, foram também obtidos em Toxoplasma gondii. Estudos anteriores em T. gondii demonstraram que os MTs subpeliculares são muito estáveis. Esta estabilidade está possivelmente relacionada com modificações pós-traducionais (MPT) da tubulina, uma vez que, ao contrário dos vertebrados, estes organismos possuem uma família multigénica de α- e β-tubulinas composta por um número reduzido de membros. As MPTs referidas parecem modelar a interação dos MTs com as proteínas que lhes estão associadas. Mais ainda, em T. gondii, foram descritas proteínas que cobrem os MTs, num padrão complexo e definido, e que são importantes para a estabilidade dos mesmos. Deste modo, as proteínas que interagem com os MTs podem desempenhar um papel crucial na regulação do citoesqueleto do parasita aquando da invasão da célula hospedeira. Outras proteínas importantes para a regulação da dinâmica do citoesqueleto de MTs são os cofactores da tubulina, os quais participam nas vias de “folding”, dimerização e dissociação do dímero de tubulina. Estes cofatores controlam a proteostase da tubulina, através do controlo da “pool” de tubulina solúvel, participando na regulação da dinâmica dos MTs in vivo. Consequentemente, estas proteínas são candidatas a desempenhar um papel crucial nas modificações observadas no citoesqueleto de MTs do parasita aquando da invasão da célula hospedeira. Neste contexto o nosso objetivo principal foi avaliar e caracterizar o papel do Cofator B da Tubulina (TBCB de “Tubulin-binding cofactor B”) em T. gondii. Esta é uma proteína relativamente pequena que possui um domínio CAP-Gly na sua extremidade C-terminal e um domínio semelhante à ubiquitina (UBL de “ubiquitin-like”) na extremidade N-terminal. Em conjugação com o Cofactor E da tubulina (TBCE de “Tubulin binding cofactor E”), o TBCB dissocia o dímero de tubulina, controlando desta forma a “pool” de tubulina solúvel disponível na célula e consequentemente a dinâmica do citoesqueleto de MTs. A escolha do parasita protozoário T. gondii como modelo biológico deve-se ao facto de o mesmo possuir um genoma totalmente sequenciado e bem anotado, juntamente com o vasto conjunto de ferramentas disponíveis para a sua manipulação genética. Neste trabalho identificámos o gene do Tbcb em T. gondii, analisámos os níveis de expressão por RT-PCR durante o processo de invasão da célula hospedeira e de replicação, estudámos a localização intracelular do TgTBCB usando um anticorpo produzido no nosso laboratório e recorrendo a microscopia confocal e de super resolução, examinámos o fenótipo de TBCB em excesso (sobre-expressão por integração ao acaso) e de ausência do TBCB (deleção do gene utilizando o sistema CRISPR/Cas9). Nestes dois últimos casos foram criadas e selecionadas linhas transgénicas de parasitas, as quais foram analisadas em ensaios de crescimento (formação de pacas, invasão, replicação e egresso) bem como por western blot e por microscopia de fluorescência. Da análise dos níveis da expressão do Tbcb de T. gondii durante o processo de invasão e de replicação do parasita na célula hospedeira, notámos uma diminuição significativa dos níveis de expressão às 4 horas após a invasão da célula hospedeira, à qual se seguiu uma fase de recuperação desses níveis. Quanto à localização sub-celular do TgTBCB, observámos que em T. gondii esta proteína tem uma localização polarizada, estando localizada essencialmente no polo anterior, junto do conoide, podendo, por vezes, ser também observada uma marcação menos abundante no polo posterior. Constatámos ainda que o TgTBCB co-localiza parcialmente com as proteínas 2 e 3 das micronemas e com a tubulina glutamilada. Foi ainda possível constatar que na região apical o TBCB em T. gondii parece co-alinhar com os MTs subpeliculares, MTs que afunilam para estarem ancorados ao anel polar. Desta forma, o TBCB também parece estar junto ou imediatamente abaixo ao anel polar apical. Observámos que o excesso de TgTBCB causa uma queda acentuada na capacidade de formar placas de lise em tapetes celulares, a qual foi acompanhada de forma proporcional por uma diminuição notória dos níveis de invasão de células pelos parasitas. Curiosamente, não verificámos qualquer alteração na replicação ou no egresso dos mesmos. Em relação à deleção do gene Tbcb do parasita, 72 horas após a indução da CRISPR/Cas9 comprovámos a completa ausência de TgTBCB por western blot. Observámos também que a viabilidade dos parasitas sem TgTBCB não supera uma semana e que após a indução da deleção do gene, os parasitas demonstraram uma enorme redução na capacidade de invasão e também de replicação. Isto é, os poucos parasitas que conseguiam invadir as células hospedeiras apresentavam enormes problemas na replicação. Por western blot, nos extratos proteicos insolúveis, notámos uma diminuição nos níveis de a-tubulina, tubulina acetilada e poliglutamilada. Estes resultados também foram confirmados por imunofluorescência. Constatámos ainda que os parasitas sem TgTBCB apresentavam vários problemas de divisão, entre eles a alteração do eixo de divisão, a perda do controlo da divisão e a formação de células com morfologia arredondada, compatível com a perda de polaridade. Por microscopia eletrónica observámos também a perda de polaridade dos parasitas bem como a presença de núcleos de dimensões muito superiores ao normal ou dois núcleos dentro da célula, sem que a divisão celular tivesse sido concluída. Concluindo, o TgTBCB é uma proteína com uma localização polar, sendo observada no polo anterior abaixo do conoide e junto ao anel apical polar, acompanhado os MTs subpeliculares na região apical. A sua co-localização parcial com as proteínas das micronemas e com os MTs subpeliculares, bem como os seus parceiros já descritos em células de mamífero (proteínas de ligação aos MTs), juntamente com o fenótipo de invasão, sugerem que esta proteína em T. gondii poderá estar envolvida no tráfego vesicular ao longo dos MTs subpeliculares. A sobre-expressão do TgTBCB demonstrou a importância desta proteína no processo de invasão e a sua deleção provou que é essencial quer para a invasão quer para a replicação do parasita, visto que na ausência de TgTBCB há um comprometimento irreversível do citoesqueleto de MTs do parasita, levando à morte em menos de uma semana. Este fenótipo, aparentemente, está associado à diminuição dos MTs subpeliculares bem como à impossibilidade de formar novos MTs nas células filhas. Em suma, o TgTBCB é uma proteína essencial em T. gondii, podendo constituir um novo potencial alvo para novas estratégias de controlo e tratamento do parasita. Descrição: Tese de Doutoramento em Ciências Veterinárias na Especialidade de Ciências Biológicas e Biomédicas

Consequences of varying dietary starch content on metabolic status and production level in dairy cows

2020-06-25T06:06:24Z

Título: Consequences of varying dietary starch content on metabolic status and production level in dairy cows Autor: Santos, Ana Leonor Louro Pereira dos Resumo: Subacute ruminal acidosis (SARA) is one of the most common metabolic diseases in dairy cows. The main cause for SARA is an excessive feeding of fermentable carbohydrates, mainly starch. To test the effect of varying starch levels in the diets on metabolic status and productive performance, six lactating Danish Holstein cows with ruminal cannulas and permanent intercostal artery catheters were used in a replicated 3 x 3 Latin square design. Animals were fed ad libitum with a control diet containing 20% starch (DM basis) during the adaptation period (6 days). At day 7 (D1), 9, 11 and 13 (D4) cows received one of the experimental diets containing either 28, 35, 42% starch (DM basis) corresponding to low, medium and high treatments. At day 8, 10, 12 and 14 cows were fed with the control diet. Rumen fluid (ventral and medial), blood, urine and milk samples were collected at day 6, 7 and 13, at -0.5, 1, 2.5, 4, 5.5 and 7 h relative to feeding. Additionally, milk yield, water intake and dry matter intake were recorded. In all samples, pH was measured. In blood samples, partial pressure of O2 and CO2 were measured. In milk samples, glucose, glucose-6-phosphate, β-hydroxybutyrate, lactate dehydrogenase, creatinine, malate, isocitrate and urate concentrations were measured using an enzymatic-fluorometric method. Daily milk samples were also measured for fat, protein, somatic cell count (SCC) and lactose using infrared spectrometry. The MIXED procedure of SAS was used with a model including starch level, sampling time and interaction between both as independent variables, and cow as a repeated effect. Production performance parameters (milk yield, fat, protein, SCC and lactose) were not affected by treatment nor were dry matter and water intake (P>0.05). Parameters affected by time were due to normal metabolic alterations during rumination. Ventral fluid pH was affected by treatment on D1, increasing from the medium treatment to the high treatment (6.19 ± 0.08 and 6.45 ± 0.08, respectively; P=0.01). Blood pH decreased in the medium and high treatments compared to the low treatment (7.50 ± 0.01 and 7.52 ± 0.01, respectively; P=0.02) on D4. Milk urate concentration increased in the medium treatment compared to the low treatment on D1 (129.6 ± 3.79 and 155.5 ± 8.48, respectively; P=0.01) and D4 (110.9 ± 3.79 and 105.7 ± 8.48, respectively; P=0.04). Milk pH decreased in the high treatment compared to the low treatment (6.75 ± 0.01 and 6.80 ± 0.01, respectively; P=0.02) on D1. Milk malate and creatinine were affected by the interaction on D4 (P<0.05) while isocitrate was affected on D1 (P=0.03). Our results demonstrate that all groups had some level of SARA. In general, cows had more metabolic imbalances on D1 than on D4 leading to the conclusion that the rumen microbiome adapted to the high starch content and cows also able to adapt the different metabolic pathways related to excretion of the acid, allowing cows to cope with high levels of dietary starch.; RESUMO - A acidose ruminal subaguda (ARS) é uma doença metabólica comum em vacas leiteiras. A principal causa é a alimentação com excesso de hidratos de carbono fermentescíveis, nomeadamente o amido. Para estudar o efeito da variação do conteúdo de amido nas dietas no estado metabólico e desempenho produtivo, foi realizado um ensaio com seis vacas Danish Holstein lactantes com cânulas ruminais e cateteres na artéria intercostal, num design quadrado latino replicado 3 x 3. A alimentação foi ad libitum com dieta controlo com 20% de amido (MS) durante o período de adaptação (6 dias). No dia 7 (D1), 9, 11 e 13 (D4), foi fornecida uma dieta experimental com 28, 35 ou 42% de amido (MS) correspondendo ao tratamento baixo, médio e alto. No dia 8, 10, 12 e 14 foi fornecida dieta controlo. Foram recolhidas amostras de fluído ruminal (ventral e medial), sangue, urina e leite nos dias 6, 7 e 13, às -0.5, 1, 2.5, 4, 5.5 e 7 h relativamente à hora de alimentação. Foram registados nestes dias o leite produzido, consumo de água e ingestão de matéria seca. Foi medido o pH de todas as amostras. A pressão parcial de O2 e CO2 nas amostras de sangue foi determinada. Foi medida a concentração de glicose, glicose-6-fosfato, β-hidroxibutirato, lactato desidrogenase, creatinina, malato, isocitrato e urato nas amostras de leite utilizando um método enzimático fluorométrico. Foi também determinada a gordura, proteína, contagem de células somáticas (CCS) e lactose nas amostras de leite utilizando espetrofotometria infravermelha. Foi utilizado o procedimento MIXED do SAS com um modelo que incluía nível de amido, hora de amostragem e interação entre os dois como variáveis independentes e a vaca como efeito repetido. O desempenho produtivo (quantidade, gordura, proteína, CCS e lactose), a ingestão de matéria seca e o consumo de água não foram afetados pelo tratamento (P>0.05). Os parâmetros afetados pelo tempo são resultado das alterações metabólicas durante a ruminação. O tratamento afetou o pH do fluído ventral em D1, aumentando do tratamento médio para o alto (6.19 ± 0.08 e 6.45 ± 0.08, resp.; P=0.01). O pH do sangue diminuiu nos tratamentos médio e alto em comparação com o baixo (7.50 ± 0.01 e 7.52 ± 0.01, resp.; P=0.02) em D4. A concentração de urato aumentou no tratamento médio em comparação com o baixo em D1 (129.6 ± 3.79 e 155.5 ± 8.48, resp.; P=0.01) e D4 (110.9 ± 3.79 e 105.7 ± 8.48, resp.; P=0.04). O pH do leite diminuiu no tratamento alto em comparação com o baixo (6.75 ± 0.01 e 6.80 ± 0.01, resp.; P=0.02) em D1. A concentração de malato e creatinina no leite foram afetados pela interação em D4 (P<0.05) e o isocitrato em D1 (P=0.03). Todos os grupos sofreram ARS. Em geral, as vacas demonstraram mais desequilíbrios metabólicos em D1 do que em D4, concluindo que o microbioma ruminal adapta-se ao tratamento e que os animais ajustam as vias metabólicas de excreção do ácido, desvalorizando o elevado conteúdo de amido na dieta. Descrição: Dissertação de Mestrado em Engenharia Zootécnica/Produção Animal

Comparação entre as vacinas Letifend® e CaniLeish® relativamente aos seus efeitos secundários em cães domésticos : um estudo retrospetivo

2020-06-25T06:05:52Z

Título: Comparação entre as vacinas Letifend® e CaniLeish® relativamente aos seus efeitos secundários em cães domésticos : um estudo retrospetivo Autor: Fonseca, Brigite Neto da Resumo: A leishmaniose canina é provocada pelo parasita Leishmania infantum, sendo que, a doença tem efeitos generalizados no organismo, uma vez que afeta células do sistema fagocitário mononuclear, como os macrófagos. Atualmente, um dos métodos de controlo e prevenção desta doença envolve o uso de vacinas nos cães. O objetivo principal deste estudo retrospetivo foi avaliar a incidência e o tipo de efeitos secundários desenvolvidos pelos cães após o uso de duas vacinas, a CaniLeish® e a Letifend® e posteriormente comparar as duas vacinas em termos da sua segurança. Foram colhidos dados de 157 cães (73 inoculados com CaniLeish® e 84 com Letifend®). Dos animais vacinados com CaniLeish®, 15 desenvolveram efeitos adversos, sendo que, a incidência destes efeitos não aparentou estar relacionado com a idade ou com o sexo do animal. Contudo, parece ter havido uma relação com o peso dos cães, uma vez que, 12 dos animais afetados tinham um peso inferior a 15 Kg. Consequentemente, as raças de cães que apresentavam estes efeitos eram na maioria de pequeno porte, como o Yorkshire Terrier. Pelo contrário os animais vacinados com Letifend® não desenvolveram qualquer efeito adverso, pelo que, com base na amostra estudada, concluiu-se que esta é uma vacina mais segura comparativamente com a CaniLeish® no que respeita ao aparecimento de reações secundárias.; ABSTRACT - COMPARISON BETWEEN THE VACCINES CANILEISH® AND LETIFEND® IN RELATION TO THEIR SECONDARY EFFECTS IN DOMESTIC DOGS: A RETROSPECTIVE STUDY - Canine leishmaniasis is caused by the parasite Leishmania infantum, and the disease has widespread effects on the body, as it affects cells of the mononuclear phagocytic system, such as macrophages. Currently, one of the methods of control and prevention of this disease involves the use of vaccines in dogs. The main objective of this retrospective study was to assess the incidence and type of secondary effects developed in dogs after the use of two vaccines, CaniLeish® and Letifend®, and then compare the two vaccines in terms of their safety. Data was collected from 157 dogs (73 inoculated with CaniLeish® and 84 with Letifend®). Of the animals vaccinated with CaniLeish®, 15 developed adverse effects but the incidence of these effects did not appear to be related to the age or sex of the animal. However, there seems to have been a relationship with the weight of the dogs since 12 of the affected animals weighed less than 15 kg. Consequently, the breeds of dogs that had these effects were mostly small, such as the Yorkshire Terrier. On the contrary, the animals vaccinated with Letifend® did not develop any adverse effects, based on the studied sample, so it was concluded that this is a safer vaccine compared to CaniLeish® in what concerns secondary reactions. Descrição: Dissertação de Mestrado Integrado em Medicina Veterinária